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生化試劑常見問題

2024/8/9 13:51:11  作者:索萊寶


 常量法和微量法試劑盒能否通用?

同一指標的常量法與微量法試劑盒不可以通用,因為兩者測定體系不同。如果用戶自行改變體系,公司不能保證測定質量。
比色皿有哪些規格?
(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法試劑盒都是選用1mL體系,只能用1mL比色皿,不可以用更大體積的比色皿, 否則試劑量不夠,無法正常比色。如果用戶需要,自行購買公司的1mL比色皿。 (2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法試劑盒都是選用0.25mL比色皿。如果用戶需要,自行購買公司的0.25mL 比色皿。一般客戶都選擇使用酶標儀(需要自備酶標板)。 (3)紫外波長檢測需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。 (4)不同規格的比色皿,其外觀大小是一致的,都是1cm光徑(也有0.5cm光徑的比色皿,不常見,也可以用,但是計算 時要注意修改計算公式),其內容積差異在于壁的厚度。
UV板和普通酶標板有何區別?
(1)微量法一般使用酶標板,當檢測波長≥380nm時,用一般的酶標板即可,價格便宜,一次性使用當然也可以用UV板代替, 只是有些浪費。當檢測波長<380nm時,須選用區別于一般酶標板的UV酶標板。價格比普通的酶標板貴,但可用洗板機清洗, 重復利用。貨號YA0602 96孔UV紫外檢測酶標板(未滅菌) (2)最終測定的反應液為有機試劑時(乙醚、丙酮、乙酰乙酯、四氫呋喃、甲苯、氯仿等有機試劑),避免使用聚苯乙烯材質的96孔板。
為什么有些試劑盒不提供標準品?
(1)這個根據最后酶活定義來決定的,能提供的盡量提供,有些酶活測定的試劑盒,這種酶本身就很難獲得。 (2)有些檢測對象本身就無法購買到標準品。
試劑盒應該在多長時間內用完?
(1)為了保證測定質量,試劑盒開封后一般應該在一個月內用完。 (2)用戶樣品量大時,可以一次訂購,分批生產和發貨。 (3)特別值得注意的是,出于試劑穩定性考慮,說明書特別標明現配現用的試劑,配制后應該短時間內用完(如2小時),絕對不可以過夜。 (4)為了用戶方便,公司通常分裝成幾個試劑瓶中,用戶可以根據實際測定需要,進行配制。
按照說明書冷藏后出現沉淀的試劑還可以用嗎?
可以。但是應該在常溫中充分溶解后再用,以免試劑濃度變小,造成測定不可靠。
試劑變色后還可以用嗎?
不可以。建議用戶注意避光保存,使用前一定要觀察試劑顏色是否正常。
可以改變說明書中加試劑順序嗎?
不可以,否則可能造成反應不能正常進行,導致測定失敗。強烈建議加完試劑后立即混勻。
加完試劑后是如何振蕩混勻的?
使用分光光度計的用戶,可以將反應液加在離心管里,通過手動混勻或用渦旋振蕩器混勻后馬上轉移 到比色皿中檢測,也可以將試劑放在比色皿中,迅速換成0.2ml的移液槍混勻。使用酶標儀的用戶,可以 將酶標儀在測定開始前設置一個5秒鐘的振蕩程序。
為什么吸光度特別高?
(1)現在分光光度計或者酶標儀,允許測定的吸光度有一定的范圍。 (2)吸光度特別高,導致吸光度變化不再符合朗伯比爾定律,同時靈敏度也會降低。 (3)吸光度特別高,可能因為樣品提取液在該波長下有其它強烈吸收的物質,添加的底物濃度高, 紫外波長下用的玻璃比色皿,或者普通酶標板,比色皿臟,者比色皿不透光一面對著光源等。
試劑盒中-20度保存的干粉溶解后如何保存?
建議溶解后分裝凍存,防止反復凍融。試劑盒開封后建議2周內用完。
標簽上寫著放4度保存,不小心放在了-20度,還能用嗎?
一般情況拿出來放4度,沒有析出的情況下是可以使用的,但是有的試劑寫著切記放-20度,這種情況下是不能使用的。 所以建議客戶收到產品后先詳細的看一下說明書。
如何選擇比色皿或者96孔板?
波長小于380nm的為紫外光區,需要用石英比色皿或者96孔UV板檢測;波長大于380nm的為可見光區,不論石英或者玻璃比色 皿、96孔板均可檢測。但若最終測定的反應液為有機試劑時(乙醚、丙酮、乙酰乙酯、四氫呋喃、甲苯、氯仿等有機試劑), 避免使用聚苯乙烯材質的96孔板。
測定時間段的試劑盒的注意事項?
(1)測定時間短:建議使用比色皿或者96孔板一個一個進行測量,加完所有試劑后快速混勻(使用微量比色皿一定要將槍頭 插至比色皿底部進行混勻操作)進行測量,如測定多個樣本可以在加完最后一個試劑后開始計時,混勻固定時間(10s、20s)再進行測量 (2)測定時間長(10min、30min):微量法可以使用96孔板進行測量,可以使用排槍加入同樣的試劑。測定的每一列樣本可以錯開時間 進行測量以保證數據的準確性,防止一次測量過多樣本使起始反應時間不同而導致數據不準確。
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